Как выбрать решение для консервации образцов?

Как выбрать тип консервационного раствора?

По составу жидкости ее можно условно разделить на два типа: инактивированную и неинактивированную. Среди них раствор для консервации инактивированного вируса содержит Трис, соль гуанидина, ЭДТА и т. д., основная цель которых — разрушить белковые оболочки клеток и вирусов и высвободить нуклеиновые кислоты, так что обнаружение нуклеиновых кислот может быть выполнено с помощью последующей флуоресцентной RT-PCR в реальном времени, чтобы определить, содержит ли образец последовательность вируса.

Инактивированный консервирующий раствор может эффективно лизировать структуру вируса и лишить его способности заражать. Это безопаснее для инспекторов и может эффективно подавлять размножение грибков и бактерий. Однако из-за добавления соли гуанидина в растворе нуклеиновой кислоты могут оставаться ионы соли. Если концентрация слишком высока и если активность полимеразы в следующем наборе для тестирования очень чувствительна к концентрации ионов соли, это приведет к запаздыванию значения Ct теста или даже к ложноотрицательному результату.

Решение для неинактивированной консервации обычно включает типы UTM и VTM. Компоненты раствора для консервации неинактивированных вирусов в основном основаны на растворе Хэнка. На основе раствора Хэнка также добавляют различные буферы, такие как гентамицин, грибковые антибиотики, БСА (бычий пятый компонент сывороточного альбумина), биологический буфер HEPES, аминокислоты, криопротекторы, глицерин и другие компоненты, используемые для поддержания целостности и биологической активности вируса. Неинактивированный консервационный раствор лучше сохраняет целостность вируса, поэтому уровень обнаружения выше, но перед обнаружением требуется инактивационная обработка на водяной бане.

Пользователи могут выбрать тип решения для консервации в соответствии со своими сценариями использования.

2. Какова чувствительность обнаружения после хранения образца?

Чтобы облегчить выбор различных типов пробирок для хранения, мы протестировали разные марки, условия хранения при температуре 4 ℃ и разные дни хранения. Чувствительность обнаружения нуклеиновых кислот нового коронавируса заключается в следующем.

После 14 дней хранения при температуре 4°C сравнение консервационного эффекта различных марок UTM.

Чтобы облегчить выбор различных типов пробирок для консервации, мы протестировали чувствительность обнаружения нуклеиновых кислот нового коронавируса при различных марках, условиях хранения при комнатной температуре и в разные дни хранения (первый день, третий день и седьмой день). Результаты следующие.

После 7 дней хранения при комнатной температуре сравнение эффектов хранения ITM разных марок.

После 7 дней хранения при комнатной температуре сравнение эффектов хранения различных марок ВТМ.

После 7 дней хранения при комнатной температуре сравнение эффектов хранения UTM разных марок.

В целом значение Ct Bioteke ниже, чем у некоторых распространенных брендов, представленных на рынке, независимо от комнатной температуры или условий хранения 4 ℃. Чувствительность обнаружения выше, а результаты испытаний более стабильны.

3. Каков эффект раствора для консервации инактивации (ITM)?

Количество бляшек в разное время инактивации (0, 1, 2, 5, 10, 20, 40 мин)

Цифры бляшки в разные сроки инактивации (0, 1, 5, 40 мин) (бляшка показана в красной рамке)

Выводы:

Продукт Bioteke, инактивирующий транспортную среду (ITM), может эффективно инактивировать вирус ВПГ-1.

4、Функции решения для защиты от вирусов Bioteke

а) Предоставление нескольких типов решений по сохранению, таких как UTM, VTM и ITM;

б) Его можно использовать с тампоном Bioteke для удовлетворения различных потребностей;

в) Отобранное сырье, сопоставленное с набором для экстракции нуклеиновых кислот Bioteke, чтобы обеспечить начальное количество копий образца.

5. Инспекция сообщает, что Bioteke получено для решения по сохранению вирусов.

Приложение: производственная среда

Ссылки

【1】《Руководство по новой технологии лабораторного тестирования коронарной пневмонии (третье издание)》, Китайский центр по контролю и профилактике заболеваний.

【2】《Временные рекомендации по сбору, обращению и тестированию клинических образцов от пациентов, находящихся под следствием (PUI) на новый коронавирус 2019 года (2019-nCoV)》.

【 3 】 А. Стивен К. Хашми, Мириам Бюрле, Михаэль Вёльфле и др.

Квалификация флокированных тампонов с высокой степенью извлечения по сравнению с традиционными вискозными тампонами для микробиологического экологического мониторинга поверхностей [J]. PDA журнал фармацевтической науки и технологий, 2008, 62(3):191.

【4】 Дейли П., Кастричиано С., Чернески М., Смиея М. Сравнение флокированных и вискозных мазков для сбора респираторных эпителиальных клеток у неинфицированных добровольцев и пациентов с симптомами. J Clin Microbiol, 2006;44(6):2265-2267. doi:10.1128/JCM.02055-05.

【5】Ба Хуацзе, Цзинь Мин, Ван Линьшэн и др. Сравнение эффектов типирования ДНК между нейлоновыми и ватными тампонами [J]. Китайский журнал судебной медицины, 2015(03):53-56.

【6】Лю Яньбинь, Лю Тао, Цуй Юэ, Ван Бо, Ло Фэнмин. Сравнение двух методов отбора проб мазка из носа и мазка из зева при скрининге нуклеиновых кислот на новую коронавирусную пневмонию[J]. Китайский журнал респираторной и критической помощи, 2020, 02:141-143.