Просмотры:0 Автор:Pедактор сайта Время публикации: 2022-05-25 Происхождение:Работает
Подготовка коллоидного золотого раствора для Тест антигена Принимает метод восстановления цитрата тризодий для приготовления коллоидного золотого раствора. Возьмите 1000 мл ультрапирной воды и нагрейте ее до кипения на магнитной мешалке, добавьте 40 мл раствора 1% хлоруауриновой кислоты, когда раствор снова закипает, быстро добавьте 36 мл 1% раствора цитрата тризодия, продолжайте до кипения, когда цвет Раствор превращается в фиолетовый 5 минут, выключите обогреватель и восстановите в исходном объеме с ультрапирной водой после охлаждения. Средний диаметр и дзета -потенциал частиц коллоидного золота измеряли с помощью анализатора размера наночастиц и хранили при комнатной температуре в темноте. Итак, какова информация о приготовлении коллоидных растворов золота для теста антигена? Давайте взглянем.
Вот список контента:
L Приготовление коллоидного золота с маркировкой конъюгатов
L Приготовление тестов -тестов на антиген
L Минимальный лимит обнаружения
L Тест стабильности
Возьмите 100 мл тестирования антигена коллоидного золота в два чистых стакана, соответственно, в соответствии с оптимизированными отмеченными условиями pH, добавьте 3,3 мл и 2,1 мл 0,1 моль/л карбоната калия, чтобы регулировать pH, перемешайте магнитной мешалкой при 300 r/ Мин в течение 10 минут и добавить моноклональное антитело белка анти-N мышиного белка и белок DNP-BSA DNP-BSA, каждый из которых был 1 мг и перемешивался в течение 15 минут; Добавляли 2 мл 10% раствора BSA, и добавляли 2 мл 10% раствора BSA, и перемешивание продолжалось в течение 20 минут; После перемешивания раствор коллоидного золота на антиген переносили в две центрифужные трубки 50 мл, устанавливали параметры центрифуги составляли 9000 об/мин, 20 мин и 4 ° C, а центрифугирование проводилось. После центрифугирования осторожно выньте центрифужную трубку, не встряхните, удалите супернатант с пипеткой, собирайте осадок, восстановите его с помощью сопряженного разбавителя до 10 мл и храните при 4 ° C в темноте. Средний диаметр и дзета -потенциал тестов -антигенов коллоидных золотых конъюгатных частиц измеряли с помощью анализатора размера наночастиц.
Прокладка для образца была равномерно покрыта раствором для обработки пробы для образца, а количество покрытий каждого стеклянного волокна составляло 30 мл и сушили при 50 ° C в течение 24 часов. Разбавить быстрый тест антигена Коллоидное золото, меченное мышиным моноклональным антителом и коллоидным золотом, меченным золотом, конъюгатом белка DNP-BSA с разбавителем конъюгата, соотношение объема составляет 18% и 20% соответственно, и лечить с разбавленным коллаидным золотым конъюгатом золота. Покрытая жидкостью, количество покрытия каждого стеклянного волокна составляло 30 мл, и его высушивали при 45 ° С в течение 24 часов. Моноклональное антитело к белке мышиного анти-N и поликлональное антитело против DNP кролика разбавляли PBS, содержащим 0,01 моль/л ph7,4 и 5% трегалозы до концентрации 2,0 мг/мл и 1,0 мг/мл соответственно. В качестве линии обнаружения (T -Line) и линии контроля качества (Cline) антитело захвата покрывали нитроцеллюлозной мембраной (мембрана NC) и сушили при 45 ° C в течение 48 часов. Подготовленная пленка NC, конъюгатная прокладка, проба с образцом и поглощающая воду была вставлена на нижнюю пластину из ПВХ, в свою очередь нарезала на 3 мм/полоску на столк, положила в корпус для карты и упаковала в алюминиевую мешок из фольги. Во время теста вставьте лопок с носоглотом в подъемную трубку, предварительно заполненную экстракционным раствором (10моль/LPBS, pH7,4, 1%NP-40), и добавьте 3 капли (100 мкл) в отверстие для образца испытания карта после извлечения в течение 15 с. 15 -минутное время реакции для визуальной интерпретации. Тест антигена T-линия и Cline являются положительными, T-линия не окрашенна, Cline отрицательный, Cline не окрашен, что указывает на то, что тестовая полоса эффективна, и ее необходимо пройти.
Минимальные исследования лимического обнаружения были проведены с тепловыми вирусными культурами. В качестве негативной матрицы для теста на антиген использовался элеат от носоглоточных мазков от здоровых людей. Во-первых, было выполнено 10-кратное градиент разбавление. После отрицательного результата теста быстрого антигена предыдущая концентрация была затем в 2 раза разбавление градиента, и не менее 19 раз из 20 тестов было положительным. Уровень концентрации (≥95%) использовался в качестве минимального предела обнаружения реагента.
Поместите приготовленную тест -тест на антиген готовый реагент в духовке 50 ° C и протестируйте с высоким и низким контролем качества концентрации каждые две недели. Повторите тест 3 раза для каждого образца. Разница в глубине полосы между реагентом разрушения высокой температуры и контрольным реагентом в течение 1 недели и 8 недель.
Выше приведено соответствующая информация о приготовлении коллоидного золотого раствора для теста антигена. Если вы заинтересованы в COVID-19, SARS-COV-2 RAPE ANTIGEN TESS, вы можете связаться с нами. Наш веб -сайт www.bioteke.cn.
